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成像常见问题

凝胶成像系统常见问题

凝胶成像即是对DNA或RNA胶进行切胶、拍照、观察、分析的实验室类仪器,凝胶成像系统可以应用于分子量计算、密度扫描、密度定量、PCR定量等生物工程常规研究。

凝胶成像在医学生物研究方面得到广泛的应用,比如蛋白质、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分离纯化结果作定性分析。

对于凝胶成像系统,简单从字面上理解,也并不是都能很好的被解释清楚的,若是应用起来,其专业性,相信没试验应用过,也是难以操作与理解的。下面就对凝胶成像系统的术语、应用领域、注意事项等做个简单的描述。

 
1、何为凝胶成像系统
样品在电泳凝胶或者其他载体上的迁移率不一样,以标准品或者其他的替代标准品相比较就会对未知样品作一个定性分析。这个就是图像分析系统定性的基础。根据未知样品在图谱中的位置可以对其作定性分析,就可以确定它的成份和性质。 样品对投射或者反射光有部分的吸收,从而照相所得到的图像上面的样品条带的光密度就会有差异。光密度于样品的浓度或者质量成线性关系。根据未知样品的光密度,通过于已知浓度的样品条带的光密度指相比较就可以得到未知样品的浓度或者质量。这就是图像分析系统定量的基础。采用最新技术的紫外透射光源和白光透射光源使光的分布更加均匀,最大限度的消除了光密度不均造成的对结果的影响。

2、凝胶成像的适用范围

  • 蛋白质、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分离纯化结果作定性分析。
  • 可以确定生物分子的分子量。
  • 可以应用于生物分子的定量分析中。
  • 3、凝胶成像一般操作步骤?

  • 打开凝胶成像系统开关。
  • 打开电脑,系统自动打开并进入成像软件。
  • 打开凝胶成像系统前面板,选择使用紫外透射光源或者白光透射光源,将相应光源安放到位。
  • 将样品放置在透射光源的样品台上。
  • 在成像操作界面里面选择使用Upper white光源,点击绿色(即时成像)按钮。

  • 4、是不是像素越高,产品就越好?
    像素是要针对成像设备来看的,比如数码相机与CCD的像素就不具备可比性,其次CCD本身的质量比单纯的像素高低更重要。对于同级别CCD最重要的指标是其大小,也就是CCD尺寸,尺寸越大其本身价值就成几何倍数地增长。


    5、配件紫外反射灯源的主要用途为何?
    紫外反射灯源使用并不广泛,主要是提供非透明材质的DNA跑胶载体如纸层析等的成像需要而使用。由于比较常用的还是透明的琼脂糖凝胶与聚丙烯酰胺凝胶,透射光源完全可以满足,因此将紫外反射光源作为选配件不列入标配中。


    6、为何要采用自动变焦镜头,有何意义?
    自动变焦镜头无需手动调节,可操作性强,同时也减少了EB潜在的污染机会。再者使得将CCD内置成为了可能,从而达到防灰防尘防震的目的,更好地保护了核心部件延长产品的使用寿命。


    7、如何看待CCD的一些主要技术参数?
    CCD的主要技术参数有CCD尺寸,有效像素,信噪比,采集位数等。其中CCD尺寸与信噪比都是影响成像的关键因素,尺寸越大能接受的信号就越多。而热噪音越低,信噪比就越高,成像质量也就越好。采集位数指色彩灰度的表达范围。如采集位数为8则表示有2的8次方数量的灰度来还原色彩。


    8、紫外对人体有伤害,是否具有防护措施?
    紫外对人体,特别是眼睛有一定伤害,TOCAN凝胶成像系统具备紫外防护设施,在紫外灯开启的状态下,如不慎打开暗箱,紫外灯会自动熄灭防止对人体的伤害。


    9、能否在凝胶成像上直接切胶?
    TOCAN凝胶成像可以,如需直接切胶,首先按系统中间的观察窗,打开装有进口防紫外玻璃的观察窗口,然后打开左右两侧专为割胶所设计的小门,即可进行切胶操作。 。


    10、如何调节焦距 聚焦 光圈以获得高质量的图片?
    三个最重要的可调参数分别是焦距 聚焦和光圈。其中焦距调节清晰度,聚焦调节图像大小,光圈调节明暗。一般先把光圈调节到适宜的亮度后,再调节聚焦将图像放到最大,最后调解焦距,在图像较大的情况下焦距比较容易调节到最清晰状态,然后再把图像缩放在适宜大小后成像即可。

     

     

     

     

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